Книжка механизм трансформации: Механизмы трансформации диванов. Какие они бывают и чем отличаются?

Содержание

Механизмы трансформации диванов

Книжка ( Фокус, Фиеста, Конти )

Чтобы трансформировать диван в кровать, достаточно приподнять сидение вверх до характерного щелчка, при этом спинка откидывается назад, после чего опустить сидение вниз — диван разложен.

Плюсы:

— самый доступный по цене
— быстро и легко раскладывается
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— необходимо расстояние за спинкой дивана
— небольшая ширина спального места

Еврокнижка ( Диамонд, Блюз, Каскад 3, Каскад 3.1, Каскад 4, Каскад 5, Клауд, Стокгольм )

Для того чтобы его разложить, необходимо вытянуть или выкатить вперед сиденье и перевести спинку в горизонтальное положение, опустив ее на образовавшееся свободное место.

Плюсы:

— прост в использовании

— не имеет механизма, в с вязи с чем ломаться практически нечему
— ровное и большое спальное место
— можно ставить вплотную к стене
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— в зависимости от обивочной ткани, на спинке дивана могут оставаться неизбежные технологические следы от направляющих нижней части каркаса (не является рекламацией)

Еврокнижка на пантографе (тик-так) ( Диамонд, Каскад 3, Каскад 3. 1, Каскад 4, Стокгольм )

Принцип раскладки: взявшись за низ передней панели дивана, легким движеньем вверх и вперед выдвигаем сиденье на себя и аккуратно опускаем на пол. Спинка дивана опускается на освободившееся место, создавая ровную поверхность.

Плюсы:

— простота в эксплуатации
— прочный механизм
— абсолютно ровное и широкое спальное место

— не повреждает напольное покрытие
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

Аккордеон ( Комфорт, Сидней 1, Сидней 2 )

Складываются и раскладываются по принципу гармошки. Необходимо потянуть сиденье на себя, после чего оно поедет вперед, а двойная спинка, развернувшись, окажется на одном уровне с сиденьем.

Плюсы:

— простота трансформации
— высокая надежность и прочность механизмов
— широкое спальное место
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— требуют значительного пространства для трансформации

Венеция (дельфин) ( Топазио, Магнат, Каскад 1, Каскад 2, Каскад 1 с оттоманкой, Олимп, Легенда, Трапеза 1, Трапеза 2 )

Чтобы разложить диван, нужно из-под сиденья выдвинуть до упора дополнительную секцию, после чего за петлю движением вверх поднять спальное место.

Плюсы:

— прочный и надежный механизм
— ровное и просторное спальное место
— легок в использовании
— требует минимального места при раскладывании

Минусы:

— позволяет разместить ящик для белья только в угловом варианте дивана

Телескоп ( Лорд, Принцесса, Принц, Лорд детский )

Метод превращения дивана в удобное спальное место довольно прост: за специальный ремешок нужно выдвинуть нижнюю часть сиденья на себя, чтобы высвободить еще две секции дивана, расположенные друг под другом.

Плюсы:

— легкость и простота раскладывания
— компактность в собранном виде
— широкое спальное место
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— пониженная высота спального места (30 см вместо 40см)
— ограничение по нагрузке

Выкатной

Потянув за потайной ремешок сидения, выдвинуть диван до полного разложения. Передняя часть в этом случае выедет вперед, выдвинув за собой остальные, а спинка займет ее место.

Плюсы:

— надежный и простой в эксплуатации механизм
— компактность в собранном виде
— широкое спальное место
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— небольшая высота спального места

Тахта ( Малыш, Уют )

Существует два вида тахты:
1. Стационарная
2. Складная

Стационарная.
Механизм трансформации отсутствует. Представляет собой кровать с механизмом подъема спального места для удобного доступа к бельевому ящику.

Складная.
Принцип раскладки: сидение выдвигается вперед, а в освободившееся место, между спинкой и сидением, опускается подлокотник или кладется подушка, которая идет в комплекте с моделью.

Плюсы:

— простой механизм трансформации
— компактность дивана
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— возможен только односпальный вариант

Пума

При раскладывании нужно начать тянуть на себя основание сидения дивана, а в свою очередь уже из-под него появляется вторая часть спального места. Сиденье дивана поднимается и одновременно перемещается вперед, а расположенная под ним часть спального места поднимается вверх, занимая место сиденья.

Плюсы:

— легок и прост в эксплуатации
— просторное и удобное спальное место
— не повреждает напольное покрытие
— способен выдерживать большие нагрузки

Минусы:

— позволяет разместить ящик для белья только в угловом варианте дивана

Седафлекс (американская раскладушка) ( Виконт )

Механизм трансформации «американская раскладушка» имеет два сложения и ортопедический пружинный матрас толщиной около 12-14 см. Для трансформации необходимо потянуть механизм вверх и на себя, после чего установить диван на опорные ножки. В это же время раскладной подголовник принимает горизонтальное положение.

Плюсы:

— легок и прост в эксплуатации
— имеет достаточно толстый ортопедический пружинный матрас
— поверхность кровати является ровной и мягкой
— компактность в собранном виде
— не повреждает напольное покрытие

Минусы:

— позволяет разместить ящик для белья только в угловом варианте дивана
— ограничение по нагрузке

Миксотойл (французская раскладушка) ( Эдем, Цезарь )

Существует два варианта «французской раскладушки». В первом случае механизм имеет в основании гнуто клееные пластины (латы), поверх которых натянут тент из особо прочной ткани и матрас толщиной 40мм. Во втором случае диван обладает специальной сварной металлической сеткой, поверх которой кладется матрас толщиной 60мм. Для трансформации необходимо снять с сиденья подушки, потянуть механизм на себя и вверх, после чего развернуть звенья. При таком типе трансформации диван становится на стальные ножки.

Плюсы:

— компактность в собранном виде
— не повреждает напольное покрытие

Минусы:

— неровная поверхность спального места
— позволяет разместить ящик для белья только в угловом варианте дивана
— ограничение по нагрузке

Акнар

При этом в освободившееся пространство выдвигается подголовник, соединенный шарниром со средней секцией.

Плюсы:

— легок и прост в эксплуатации
— компактность в собранном виде
— ровное спальное место

Минусы:

— позволяет разместить ящик для белья только в угловом варианте дивана

МТД ( Олимп МТД )

Плюсы:

— благодаря телескопическому синхронизатору и паре пружин, которыми комплектуется механизм, данный механизм очень легок и прост в эксплуатации
— на спальном месте практически полностью отсутствуют стыки

— компактность в собранном виде
— абсолютно ровное спальное место
— способен выдерживать большие нагрузки

Минусы:

— позволяет разместить ящик для белья только в угловом варианте дивана

Механизм 124 — металлокаркас тройного сложения ( Лаки, Лаки 2 )

Для трансформации дивана, необходимо выкатить механизм из-под сидения дивана до упора, взяться за петлю и потянуть на себя механизм, рамку установить на один уровень с сидением дивана. Спинка дивана опускается на освободившееся место, создавая ровную поверхность.

Плюсы:

— легкость и простота раскладывания
— компактность в собранном виде
— абсолютно ровное спальное место длиной до 215cм
— способен выдерживать большие нагрузки

Минусы:

— позволяет разместить ящик для белья только при съёмных приспинных подушках либо в угловом варианте дивана

Клик-кляк

Для того чтобы разложить такой диван, необходимо опрокинуть механизм на спинку, после чего, придерживаясь за рамку сиденья, отжать последнее до щелчка и разложить его. Механизм является аналогом «книжки», но при этом в «клик-кляке» предусмотрена возможность регулировки подлокотников, а также приведения спинки дивана в промежуточное положение, благодаря которому вы можете находиться в положении полусидя или полулежа.

Плюсы:

— быстро и легко раскладывается
— является надежным механизмом благодаря металлокаркасу
— позволяет разместить ящик для белья

Минусы:

— необходимо расстояние за спинкой дивана

Кушетка ( Литали )

Диван с механизмом «кушетка» раскладывается либо выдвижением дополнительной секции вбок от сиденья, либо переведением подлокотников в горизонтальное положение. В разобранном состоянии диван-«кушетка» представляет собой односпальную кровать.

Плюсы:

— простота трансформации
— ровное спальное место
— возможность установки вплотную к стене
— позволяет разместить ящик для белья
— не занимает много места

Минусы:

— диван «одноместный»
— нагрузка на разложенные подлокотники не должна превышать 40 кг.

Вяз (кресло-кровать Диамонд)

Взявшись за низ передней панели сиденья, потянуть его вверх и на себя. Сиденье дивана поднимется и одновременно переместится вперед, а расположенная под ним вторая часть спального места поднимется и займет место сиденья. Спинка дивана опускается на освободившееся место.

Плюсы:

— компактность в собранном виде
— не повреждает напольное покрытие

Минусы:

— из-за небольшой высоты средней ножки, спальное место на несколько сантиметров ниже уровня сидения

Книжка
Еврокнижка
Аккордеон
Венеция (дельфин)
Пантограф (тик-так)
Телескоп
Выкатной
Тахта
Пума
Седафлекс (американская раскладушка)
Миксотойл (французская раскладушка)
Акнар
МТД
Механизм 124
Клик-кляк
Кушетка
Вяз

ТОП-7 лучших механизмов диванов на каждый день и для ежедневного сна

Диван можно использовать не только как место отдыха, но и для сна.

Раскладной диван — неплохая альтернатива кровати для малогабаритных квартир. В собранном виде такая мебель не занимает много места, а благодаря устройству трансформации она быстро превращается в комфортную кровать для одного или двух человек. Модель для ежедневного сна, которая будет регулярно раскладываться и складываться, должна обладать надежным механизмом для бесперебойной работы на долгие годы вперед.

Механизм трансформации — важнейший элемент конструкции. От его работы зависит срок службы мягкой мебели.

Как выбрать подходящую конструкцию? Что учитывать перед покупкой? Ознакомьтесь с нашим обзором надежных механизмов для диванов — это поможет определить, какой из них лучше подойдет на каждый день. Рейтинг состоит из семи самых популярных моделей, рассчитанных на долгий срок службы. Чтобы упростить выбор, мы отметили достоинства и недостатки каждого механизма.

Содержание статьи

Почему так важно выбрать надежный механизм
Книжка
Еврокнижка
Аккордеон
Телескоп (выкатной)
Дельфин
Пума
Пантограф (тик-так)
Итог
Каталог

Почему так важно выбрать надежный механизм

Если внутренние механизмы придут в негодность, то использовать мягкую мебель в качестве кровати не получится.

Ежедневное использование подразумевает большие нагрузки на устройство трансформации. Чем оно прочнее, тем дольше мебель прослужит по назначению — в виде постоянного спального места.

Обращайте внимание на другие факторы, влияющие на надежность: материалы, сложность устройства, репутация производителя и цену. Слишком дешевое изделие вряд ли прослужит долго.

Помимо прочности, механизм для ежедневного использования должен обладать следующими качествами:

Быть простым в ежедневной эксплуатации. Вряд ли кому-то захочется начинать или заканчивать день долгой кропотливой сборкой-разборкой постели.
Иметь простую конструкцию. Чем меньше деталей, тем меньше риск, что внутри что-то придет в негодность. Простую конструкцию легче и дешевле починить.

Чтобы узнать, какой механизм раскладки дивана самый надежный, рассмотрим каждый из них поподробнее.

Книжка

Механизм трансформации дивана «книжка»

Старое проверенное временем устройство, которое широко использовалось еще в советских раскладных диванах. Достаточно просто потянуть нижнюю часть наверх (как бы запрокинув сиденье) до щелчка, а потом отпустить. Спинка примет горизонтальное положение, образовав просторную спальную поверхность.

Это простой, но надежный механизм, который прослужит много лет. Фрагменты конструкции расположены внутри, но они компактные, поэтому под сиденьем можно устроить место для хранения вещей. Например, туда можно сложить постельное белье и другие спальные принадлежности.

Достоинства:

простота и надежность;
низкая цена;
есть свободное место для хранения вещей;
легко складывается и раскладывается — с этим справится даже ребенок.

Недостатки:

Для корректной работы требуется свободное пространство, ее нельзя ставить вплотную к стене.
Посередине образуется глубокая впадина, которая может повлиять на комфорт сна. Недостаток исправляется с помощью топпера — тонкого матраса толщиной до 10 см.

Еврокнижка

Механизм трансформации дивана «еврокнижка»

Еще один механизм, работу которого сравнивают с книгой. «Еврокнижкам» для раскладывания не нужно свободное место в задней части корпуса. Их можно спокойно ставить вплотную у стены. Но чтобы разложить такую мебель, нужно совершить больше действий. Сначала выдвинуть сиденье вперед, а затем опустить спинку. Собирается «еврокнижка» также просто — достаточно повторить действия в обратном порядке.

По строению конструкция проще классической «книжки». Спинка в ней крепится на петлях, а сиденье выдвигается вперед на колесиках. Обычно части каркаса и направляющие колесиков делают из твердых пород дерева или клееной фанеры. Простота конструкции и прочные материалы обеспечивают мебели долговечность.

Будьте аккуратны — при раскладывании спинка дивана может падать сама. Придерживайте и аккуратно опускайте ее, иначе удерживающее петли со временем разболтаются от постоянного падения спинки под собственным весом.

Плюсы:

Механизм раскладывания не занимает много места, поэтому многие производители предусматривают внутри нишу для хранения вещей. Если использовать диван по назначению ежедневно, там можно хранить спальные аксессуары: подушки, одеяла, тонкий наматрасник.
«Еврокнижка» лишена существенного недостатка «книжки» — впадины между спинкой и сиденьем в разложенном виде. Спать на нем будет комфортнее.
Самая простая модель в топе, а значит более долговечная.
Цена сравнима с «книжкой».

Минусы:

Нельзя сложить и разложить одним движением.
При выборе мягкой мебели удостоверьтесь, что передняя часть выдвигается на колесиках. Если их нет, есть риск испортить покрытие пола или ковер.

Аккордеон

Механизм трансформации дивана «аккордеон»

Механизм по принципу работы действительно напоминает аккордеон. Чтобы разложить его, нужно приподнять сиденье до щелчка, затем вытянуть его вперед вместе со спинкой (чем-то напоминает обычную раскладушку). Модель раскладывается за несколько секунд.

Главное преимущество «аккордеонов» — наличие прочного металлического каркаса с ламельной решеткой. Прямо как в полноценных кроватях! Упругие латы из дерева амортизируют нагрузку, улучшая ортопедичность постели. Спать на такой мебели будет полезнее для здоровья опорно-двигательного аппарата. А наличие металлического каркаса хорошо сказывается на долговечности и надежности изделия в целом.

Такие диваны сильно выдаются вперед — это одновременно плюс и минус. Им нужно много места впереди, но зато даже небольшие модели (~ 140 см шириной) легко образуют комфортную постель для двоих.

Плюсы:

«Аккордеон» сложнее «книжки» и «еврокнижки», он надежный и выносливый, так как полностью состоит из металла.
Ламельная решетка с березовыми латами в качестве основания улучшает ортопедические характеристики постели.
Легко складывается и раскладывается.

Минусы:

Из-за особенностей механизма в сложенном виде у таких диванов широкая спинка. В некоторых моделях это сильно заметно. Существенный минус для тех, кому важен дизайн.
Даже если в нем предусмотрен ящик для хранения вещей, он будет меньше из-за особенностей конструкции.
Мебель требует много свободного пространства впереди для раскладывания.

Телескоп (выкатной)

Механизм трансформации дивана «телескоп»

Еще один тип механизма с простым устройством. Достаточно выкатить сиденье вперед и на освободившееся пространство уложить дополнительную подушку, которая находится под сиденьем. Опускать спинку не нужно. В разложенном виде диван напоминает кровать с высоким изголовьем. На него удобнее опираться во время отдыха в постели, чем на твердую стену. Отличный выбор для тех, кто любит почитать в постели или посмотреть ТВ.

Плюсы:

Удобно отдыхать из-за высокой спинки.
Выкатная часть на колесиках — за состояние пола можно не беспокоиться.
Ровная поверхность для отдыха без впадин на местах стыков конструкции.
Умеренная цена.

Минусы:

Внутри не предусмотрен бельевой ящик.
Требует много пространства впереди (как «аккордеон»).

Дельфин

Механизм трансформации дивана «дельфин»

Чаще «дельфин» встречается в угловых моделях. Для раскладывания нужно потянуть за ремешок нижнюю часть сиденья, под которой располагается скрытая секция. Она как бы «выныривает» из-под дивана, поэтому механизм и получил такое название. В результате получается ровная кровать без стыков. Чтобы сложить его обратно, нужно потянуть ремешок наверх под углом, и секция сложится внутрь. Дополнительная подушка располагается внутри конструкции, поэтому в прямых моделях место под бельевой ящик не предусмотрено.

Плюсы:

Спинка не складывается, на нее можно с комфортом опереться — как на высокое изголовье мягкой кровати.
Для работы «дельфина» не нужно свободное место у стены.

Минусы:

В прямых моделях нет бельевого ящика.
Внутренняя секция может много весить (в зависимости от размеров и особенностей конкретной модели). Детям будет сложнее раскладывать такой диван.
В дешевых моделях уровни внутренней секции и сиденья могут различаться. Из-за этого спальная поверхность может быть неровной. Будьте внимательны при выборе.

Пума

Механизм трансформации дивана «пума»

Механизм, получивший название в честь представителя животного мира. В названии скрыт основной принцип действия — нижняя часть дивана как бы «выпрыгивает» вперед как пума. Чтобы разложить модель, нужно потянуть наверх под углом 45 градусов его нижнюю часть. Под действием пружины она как бы выдается вперед. Одновременно с этим на освободившуюся зону выдвигается дополнительный элемент, спрятанный внутри. В итоге получается ровная поверхность для сна.

Преимущества:

«Пума» выдерживает большую нагрузку — около 200 кг на спальное место.
Высокая надежность.
Можно не беспокоиться за ковер или пол, потому что нижняя секция не катится по полу на колесах, а как бы делает «шаг» вперед.
Трансформация проводится одним движением.
Спинку не нужно складывать.
Более высокая цена по сравнению с другими изделиями.

Недостатки:

Конструкция сложнее по устройству, чем остальные.
В прямых диванах нет ящика для белья. Если нужен ящик, придется покупать угловую модель.

Пантограф (тик-так)

Механизм трансформации дивана «пантограф»

По принципу действия он похож на «пуму», но проще конструкционно. Передняя секция также выдвигается одним движением, как бы делая «шаг» вперед, но затем нужно вручную опустить спинку (как в «еврокнижке»).

Часто в конструкции используется ортопедическая решетка, но встречаются модели без нее. Уточняйте наличие у производителя.

Как и в случае с «еврокнижкой», если спинка держится на петлях, старайтесь не бросать ее, а аккуратно опускайте вниз. Петли не разболтаются, и мебель прослужит дольше.

Плюсы:

повышенная выносливость — «пантограф» выдерживает больше 200 кг на спальное место;
не портит ковры и покрытие пола;
есть место для бельевого ящика;
прямая спальная поверхность;
простая конструкция;
нередко производители используют ламельную решетку.

Недостатки:

Существенных минусов у конструкции нет. Если производитель использовал качественные комплектующие, то такой диван прослужит много лет. Если детали некачественные, то срок службы такой мебели будет заметно ниже. Но это актуально для каждой модели из рейтинга.

Итог

Каждый выбирает механизм трансформации по своим требованиям

Все представленные в нашем рейтинге модели надежны и подходят для ежедневного использования. Но каждый тип конструкции имеет свои слабые и сильные стороны. Например, проверенная временем «книжка» хоть и прослужит долго, но вплотную к стене такую мебель не поставишь. А слишком глубокий стык между конструкциями может помешать отдыху — придется покупать топпер. Конструкции «Дельфин» и «Пума» имеют высокую удобную спинку (как в комфортных кроватях с высоким изголовьем), но в прямых моделях нет ниши для бельевого ящика.

Если предполагаются повышенные нагрузки и важен ортопедический эффект, обратите внимание на «пантограф». Это лучший механизм трансформации диванов, он практически лишен минусов. «Пантограф» образует ровное спальное место, а ламельная решетка внутри конструкции отвечает за ортопедические качества. По ощущениям от сна такие диваны больше всего похожи на полноценные кровати. Второй практичный вариант — «еврокнижка». Это недорогие и функциональные модели. При аккуратном обращении они прослужат вам много лет.

Сложно выбрать подходящий диван для спальни или гостиной? Обращайтесь к нашим менеджерам — они знают о мебели практически всё!

Каталог

Перейти в полный Каталог Диванов

Диван Орматек Synergy Grace

Размер, см:

140×196

85 670 ₽

171 340 ₽

-50%

Доставка — 10 — 14 дней, бесплатно

Диван Орматек Synergy Life

Размер, см:

214x92x206

88 630 ₽

177 260 ₽

-50%

Доставка — 10 — 14 дней, бесплатно

Купить

Диван Орматек Easy Home Hard

Размер, см:

160x99x205

46 530 ₽

93 060 ₽

-50%

Доставка — 10 — 14 дней, бесплатно

Купить

Диван Орматек Easy Rest Hard (левый)

5 2 отзыва

Размер, см:

88x90x190

35 450 ₽

70 900 ₽

-50%

Доставка — 10 — 14 дней, бесплатно

Купить

Диван Орматек Easy Rest Soft (левый)

Размер, см:

88x90x190

35 450 ₽

70 900 ₽

-50%

Доставка — 10 — 14 дней, бесплатно

Купить

Секундочку

Естественная трансформация, рекомбинация и восстановление

Сохранить цитату в файл

Формат: Резюме (текст)PubMedPMIDAbstract (текст)CSV

Добавить в коллекции

Создать новую коллекцию
Добавить в существующую коллекцию

Назовите свою коллекцию:

Имя должно содержать менее 100 символов

Выберите коллекцию:

Не удалось загрузить вашу коллекцию из-за ошибки
Повторите попытку

Добавить в мою библиографию

Моя библиография

Не удалось загрузить делегатов из-за ошибки
Повторите попытку

Ваш сохраненный поиск

Название сохраненного поиска:

Условия поиска:

Тестовые условия поиска

Электронная почта: (изменить)

Который день? Первое воскресеньеПервый понедельникПервый вторникПервая средаПервый четвергПервая пятницаПервая субботаПервый деньПервый рабочий день

Который день? ВоскресеньеПонедельникВторникСредаЧетвергПятницаСуббота

Формат отчета: РезюмеРезюме (текст)АбстрактАбстракт (текст)PubMed

Отправить максимум: 1 шт. 5 шт. 10 шт. 20 шт. 50 шт. 100 шт. 200 шт.

Отправить, даже если нет новых результатов

Необязательный текст в электронном письме:

Создайте файл для внешнего программного обеспечения для управления цитированием

Полнотекстовые ссылки

Глава 22

Helicobacter pylori: физиология и генетика

Книжная полка NCBI

Полнотекстовые ссылки

Обзор

Вольфганг Фишер ¹ , Дирк Хофрейтер ¹ , Райнер Хаас ¹

Гарри Л.Т. Мобли ¹ , Джордж Л. Мендз ² , Стюарт Л. Хейзелл ³

, редакторы.

В: Helicobacter pylori: физиология и генетика. Вашингтон (округ Колумбия): ASM Press; 2001. Глава 22.

Принадлежности

принадлежность

¹ Max von Pettenkofer-Institut für Hygiene und Medizinische Mikrobiologie Abteilung Bakteriologie, Pettenkoferstrasse 9a, D-80336, München, Germany

Книга

¹ Медицинский факультет Мэрилендского университета, Балтимор, Мэриленд
² Университет Нового Южного Уэльса, Сидней, Австралия
³ Университет Южного Квинсленда, Тувумба, Квинсленд

PMID: 212
Идентификатор книжной полки: НБК2465

Бесплатные книги и документы

Обзор

Wolfgang Fischer et al.

Бесплатные книги и документы

В кн.: Helicobacter pylori: физиология и генетика. Вашингтон (округ Колумбия): ASM Press; 2001. Глава 22.

Авторы

Вольфганг Фишер ¹ , Дирк Хофрейтер ¹ , Райнер Хаас ¹

Редакторы книг

Гарри Л.Т. Мобли ¹ , Джордж Л. Мендз ² , Стюарт Л. Хейзелл ³

принадлежность

¹ Max von Pettenkofer-Institut für Hygiene und Medizinische Mikrobiologie Abteilung Bakteriologie, Pettenkoferstrasse 9a, D-80336, München, Germany

Книга

¹ Медицинский факультет Мэрилендского университета, Балтимор, Мэриленд
² Университет Нового Южного Уэльса, Сидней, Австралия
³ Университет Южного Квинсленда, Тувумба, Квинсленд

PMID: 212
Идентификатор книжной полки: НБК2465

Выдержка

Бактерии получили значительную часть своего генетического разнообразия за счет приобретения последовательностей от родственных организмов. Горизонтальный перенос генов создает чрезвычайно динамичные геномы, в которых значительное количество ДНК вводится в хромосому и удаляется из нее. Эти боковые переносы эффективно изменили экологический и патогенный характер видов бактерий. Обычно наблюдаются три механизма горизонтального переноса генов: естественная трансформация, конъюгация и трансдукция. Хотя бактериофаги были описаны в Helicobacter pylori (21), в настоящее время нет доказательств того, что трансдукция действительно происходит в H. pylori . Был описан нечувствительный к ДНКазе перенос ДНК (31), но доказательства конъюгативного переноса плазмид между 90–185 H. pylori и 90–186 все еще отсутствуют. Способность к естественной трансформации была впервые описана у H. pylori несколько лет назад (39), и несколько групп изучают гены, участвующие в этом явлении, чтобы понять лежащие в его основе механизмы.

Естественная трансформация и другие механизмы горизонтального переноса генов зависят от рекомбинации ДНК. Экзогенная ДНК, поглощенная H. pylori , должна быть либо интегрирована в хромосому путем гомологичной (или сайт-специфической) рекомбинации, либо реплицирована в виде плазмиды, что также может зависеть от процессов рекомбинации для рециркуляции (4). Таким образом, гомологичная рекомбинация является предпосылкой микробной эволюции и пластичности генома, и в то же время она помогает поддерживать генетические барьеры между видами путем отбора ДНК с достаточной гомологией (35). Более того, рекомбинация является важной клеточной функцией, сопровождающей репликацию ДНК. Репликационные вилки, встречающиеся с двухцепочечными разрывами или пробелами в одноцепочечной ДНК, приводят к остановке репликации. Такие повреждения восстанавливаются путем гомологичной рекомбинации, что также необходимо для повторной инициации процесса репликации (обзор см. в ссылке 30).

Этот последний механизм, вероятно, является наиболее важной функцией пострепликативной репарации ДНК. Все организмы реагируют на постоянное повреждение их ДНК экзогенными или эндогенными факторами несколькими, возможно дублирующими, системами репарации ДНК. Помимо рекомбинационной репарации, используются и более специализированные процедуры репарации, не зависящие от репликации. Количество различных систем, по-видимому, значительно различается у разных организмов, хотя это не обязательно означает измененную скорость мутаций.

Естественная трансформация H. pylori вместе с рекомбинацией и репарацией ДНК обсуждается в этой главе, чтобы подчеркнуть взаимозависимость этих клеточных функций.

Разделы

Компетенция естественной трансформации
Гены, участвующие в поглощении ДНК
Рекомбинация
Восстановление ДНК
Рекомендации

Типы публикаций

Ссылки на полный текст

Глава 22

Helicobacter pylori: физиология и генетика

Книжная полка NCBI

Процитируйте

Формат: ААД АПА МДА НЛМ

Отправить по номеру

новый метод повышения эффективности трансформации Escherichia coli — приложение для создания библиотеки искусственных хромосом бактерий | Исследование нуклеиновых кислот

Журнальная статья

Хэн Чжу,

Хен Чжу

Ищите другие работы этого автора на:

Оксфордский академический

пабмед

Google Scholar

Ральф А. Дин

Ральф А. Дин *

Ищите другие работы этого автора на:

Оксфордский академический

пабмед

Google Scholar

Nucleic Acids Research , том 27, выпуск 3, 1 февраля 1999 г., страницы 910–911, https://doi.org/10.1093/nar/27.3.910

Опубликовано:

01 февраля 1999 г.

История статьи

Получено:

20 ноября 1998 г.

Принято:

7 декабря 1998 г.

Опубликовано:

01 февраля 1999 г.

Фильтр поиска панели навигации Исследование нуклеиновых кислотЭтот выпускЖурналы NARНаука и математикаКнигиЖурналыOxford Academic Мобильный телефон Введите поисковый запрос

Закрыть

Фильтр поиска панели навигации Исследование нуклеиновых кислотЭтот выпускЖурналы NARНаука и математикаКнигиЖурналыOxford Academic Введите поисковый запрос

Advanced Search

Abstract

Библиотеки бактериальных искусственных хромосом (BAC) играют ключевую роль в исследованиях геномики. Важным шагом в создании библиотеки BAC является преобразование Escherichia coli с помощью электропорации. На абсолютную эффективность (КОЕ/мкг ДНК) влияет ряд факторов, включая топологическую форму и обработку образцов ДНК. Здесь мы сообщаем о простом новом протоколе с использованием осаждения с помощью тРНК, который повысил эффективность трансформации в 70 раз для лигирования BAC и до 400 раз для лигирования плазмиды. Механизм может включать изменение или стабилизацию топографической формы молекул ДНК.

Библиотеки больших вставок, особенно библиотеки бактериальных искусственных хромосом (ВАС), все чаще используются в качестве основы для физических карт, клонирования на основе карт и проектов секвенирования (1). Библиотеки ВАС относительно просты в создании и содержат несколько химерных клонов (1–4). Важным шагом в создании библиотеки BAC является перенос лигированной ДНК-вставки вектора в клетки Escherichia coli . До сих пор было доказано, что электропорация является наиболее эффективным методом трансформации (5). Однако получение клонов большого размера вставки компенсируется значительным и часто неприемлемым уменьшением количества полученных клонов. Помимо размера вставки, на эффективность (КОЕ/мкг ДНК) влияют такие факторы, как компоненты буфера, температура (6) и условия электропорации, определяемые пользователями, включая градиент напряжения, сопротивление и емкость (7–10). Кроме того, генетический фон клеток-хозяев (5), постимпульсная обработка (11), топологическая форма (12) и обработка образцов ДНК (13,14) также способствуют наблюдаемой эффективности. Здесь мы описываем простой новый протокол, который увеличивает количество полученных рекомбинантных клонов (эффективность трансформации) до 70 раз для смесей лигирования ВАС и в 300–400 раз для смесей лигирования плазмид.

Электрокомпетентные клетки (эффективность > 1,5 × 10 ¹⁰ /мкг ДНК), Dh20B, готовили, как описано Hanahan (5). Для лигирования ДНК ВАС 25 нг выбранной по размеру высокомолекулярной ДНК, электроэлюированной из матрицы агарозного геля ТАЕ (25–50 мкл), и 20 нг векторной ДНК (pBACwich) в 1 мкл ТЕ смешивали и инкубировали при 56°C в течение 10 мин (15). Смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли 9 мкл 10-кратного буфера для лигирования (300 мМ Tris-HCl pH 7,5, 100 мМ MgCl ₂ , 100 мМ DTT, 10 мМ АТФ) и 12 ЕД лигазы Т4 (Promega, США). добавляли до конечного объема 100 мкл. После ночного лигирования при 16°С 5 мкл продукта лигирования смешивали с 1 мкл дрожжевой тРНК (1 мкг/мкл) (растворенной в сверхчистой воде, Gibco BRL, США) и 14 мкл сверхчистой воды. Добавляли пятьдесят микролитров 100% холодного этанола для осаждения ДНК. Через 15 мин при -20°С образец центрифугировали при 14 000 град.0306 г в течение 10 мин при 4°С. Осадок однократно промывали 100 мкл 70%-ного этанола, сушили на воздухе и ресуспендировали в 1 мкл сверхчистой воды. Двадцать микролитров компетентных клеток смешивали с ресуспендированной ДНК и трансформировали с помощью электропоратора I (Invitrogen, США) при следующих условиях: напряженность поля 13 кВ/см и постоянная времени 2,4 мс. После восстановления в 1 мл среды SOC (2% триптон, 0,5% дрожжевой экстракт, 10 мМ NaCl, 2,5 мМ KCl, 10 мМ MgCl ₂ , 10 мМ MgSO ₄, 20 мМ глюкозы, рН 7,0) при 37°С в течение 1 ч при встряхивании клетки высевали на среду LB (1% триптон, 0,5% дрожжевой экстракт, 1% NaCl, 1,5% агар), содержащую 12,5 мкг/мл хлорамфеникола, 7 мкл 200 мкг/мл IPTG и 70 мкл 20 мкг/мл X-gal на чашку диаметром 100 мм. Количество рекомбинантных клонов (белые) подсчитывали после инкубации при 37°С в течение 24 часов. В качестве контрольного эксперимента 1 мкл лигированной смеси трансформировали напрямую и определяли количество рекомбинантов. Эффективность трансформации (КОЕ/мкг ДНК) рассчитывали для каждой обработки, показанной в таблице 1, исходя из количества ДНК-вставки, добавленной в каждую реакцию лигирования.

По сравнению с прямой трансформацией смеси лигирования ВАС метод тРНК/осаждения повысил общую эффективность трансформации в 70 раз (таблица 1). Используя этот новый метод, мы регулярно получали> 1200 рекомбинантных клонов/5 мкл 100 мкл смеси для лигирования ВАС, что привело к эффективности 1,6 × 10 ⁶ КОЕ/мкг ДНК. Доля рекомбинантных клонов ВАС, оцененная по соотношению синего и белого, не изменилась при добавлении тРНК. Обработка также не повредила крупные продукты лигирования ДНК. Средние размеры вставок клонов ВАС, полученных с использованием как метода тРНК/преципитации, так и прямой трансформации, были очень схожими с аналогичными профилями распределения размеров вставок. Библиотека ВАС со средним размером вставки 130 т.п.о. была создана для пирикуляриоза риса 9.0306 Magnaporthe grisea с использованием метода тРНК/преципитации (15).

Для выяснения возможных механизмов, ответственных за это открытие, было включено множество других методов лечения. Трансформация только 1 мкг тРНК не приводила к образованию колоний. Тепловая инактивация ДНК-лигазы Т4 перед прямой трансформацией привела к 7-кратному увеличению эффективности, возможно, в результате денатурации ДНК-лигазы. Добавление тРНК после термообработки увеличивало эффективность еще в 2 раза (табл. 1). Нойманн и др. (6) предположил, что топологическая форма кольцевой ДНК влияет на эффективность трансформации; суперскрученная ДНК более эффективна, чем релаксированная ДНК. При нагревании очищенной ДНК из клонов ВАС (в сверхчистой воде) при 65°С в течение 20 мин эффективность трансформации снижалась в 5 раз. Однако, когда тРНК добавляли перед термообработкой, эффективность трансформации оставалась такой же, как и в ненагретом контроле (данные не показаны). Это говорит о том, что тРНК предотвратила релаксацию ДНК BAC, и, таким образом, эффективность трансформации осталась неизменной.

Таблица 1

Открыть в новой вкладкеСкачать слайд

Эффективность трансформации ВАС и продуктов лигирования плазмид после различных обработок после лигирования С в течение 20 мин; [B] добавлено 1 мкг тРНК; [C] Добавлено 1 мкг двухцепочечной ДНК спермы сельди; [D] Добавлено 1 мкг одноцепочечной ДНК спермы сельди; [E] 0,1 В, добавлен 3 М NaOAc; [F] Добавляли 2,5 × 100% этанола и осадок собирали центрифугированием. Осадок промывали 70% этанолом и затем ресуспендировали в сверхчистой воде.

^# Среднее ± стандартное отклонение не менее трех отдельных экспериментов с использованием одного и того же препарата электрокомпетентных клеток. Эффективность трансформации рассчитывали на основе количества ДНК в каждой реакции лигирования.

Аналогичные результаты были получены при лигировании плазмид; однако метод тРНК/осаждения повышал эффективность трансформации примерно в 300 раз для клонирования ТА (pGem T-easy, Promega, США) и примерно в 400 раз для клонирования с липкими концами (табл. 1). Для лигирования липких концов, 9В качестве вектора использовали линеаризованную pUC18 0306 Eco RI. Плазмидное лигирование создавали путем смешивания 20 нг соответствующим образом расщепленной векторной ДНК, 20 нг ДНК-вставки, 2 мкл 10-кратного буфера для лигирования и 3 ЕД ДНК-лигазы Т4 в 20 мкл реакционной смеси. Условия лигирования и электропорации плазмид были такими же, как описано для лигирования ВАС, за исключением того, что трансформированные клетки распределяли на планшетах LB, содержащих 50 мкг/мл ампициллина. Когда в качестве хозяина использовали XL-1 Blue, кратность увеличения снизилась примерно до 140 раз (данные не показаны).

Также исследовали влияние других носителей или добавок на облегчение осаждения этанолом. Лигированную плазмидой ДНК осаждали этанолом, как описано выше, за исключением того, что тРНК заменяли другими носителями или добавками, включая NaOAc (0,1 об.), двух- или одноцепочечную ДНК спермы сельди (1 мкг; Sigma, США). Двухцепочечную ДНК получали путем растворения ДНК спермы сельди в ультрачистой воде с последующим автоклавированием в течение 15 мин с последующим постепенным охлаждением до комнатной температуры. Для получения одноцепочечной ДНК двухцепочечную ДНК спермы сельди кипятили в течение 5 мин, а затем резко охлаждали на льду. Осаждение с помощью NaOAc имело лишь скромный эффект и привело к 5-кратному увеличению эффективности трансформации по сравнению с прямой трансформацией. Эта обработка и последующая промывка 70% этанолом могли удалить соли из лигирующей смеси, которые, как известно, негативно влияют на эффективность электропорации. Высокое содержание соли вызывает чрезмерное нагревание во время электропорации и Гибель клеток E.coli . Добавление одноцепочечной или двухцепочечной ДНК, хотя и приводило к повышению эффективности электропорации, было в 6–10 раз менее эффективным, чем добавление тРНК (таблица 1).

В целом эти результаты демонстрируют, что преципитация этанолом с помощью тРНК существенно увеличивает количество рекомбинантных клонов, которые можно получить путем трансформации. Механизм может включать изменение или стабилизацию топологической формы лигированных молекул ДНК. Более того, размер вставок, полученных в результате экспериментов по лигированию больших вставок, не изменился. Этот метод должен оказаться особенно ценным при построении библиотеки BAC для организмов с большими геномами.

Благодарности

Это технический вклад №. 4457 Сельскохозяйственной экспериментальной станции Южной Каролины. Это исследование было частично поддержано грантами Национального научного фонда №№ IBN951308 и DBI9724557, а также Университетом Клемсона.

Каталожные номера

Shizuya

Birren

Kim

9000

Манчино

В.

Слепак

Т.

Тачиири

Ю.

Симон

М.

5 ,
Проц. Натл акад. науч. США
,
1992
, том.
89
(стр.
8794
—
8797
)
2
9.04 P.00004 Ioannou
,
Амемия
К.Т.
,
Гарнес
Дж.
,
Кройзель
P.M.
,
Shizuya
H.
,
Chen
C.
,
Batzer
M.A.
,
DE Jong
P.J.J.
. ,
Природа Генет.
,
1994
, том.
5
(стр.
84
—
89
)

3
Ву
С.-С.
,
Гилл
Б.С.
,
Патерсон
А.Х.
,
Крыло
Р.А.
. ,
Рез. нуклеиновых кислот.
,
1994
, том.
22
(стр.
4922
—
4931
)
4
Zhang
H.
,
0005
Чой
С.-Д.
,
Ву
С. -С.
,
,
Крыло
Р.А.
. ,
Мол. Разведение
,
1996
, том.
2
(pg.
11
—
24
)
5
Hanahan
D.
,
Jesse
J.
,
Bloom
Ф.Р.
. ,
Методы Фермент.
,
1991
, том.
204
(стр.
63
—
113
)
6
Антонов
4
,
Максинова
В. А.
,
Панчева
Р.П.
. ,
Биохим. Биофиз. Acta
,
1993
, том.
1216
(pg.
286
—
288
)
7
Tekle
E.
,
Astumian
R.D.
,
Chock
P.B.
. ,
Проц. Натл акад. науч. США
,
1991
, том.
88
(стр.
4230
—
4234
)
8
T. 0D 900.4 Xie 900.040005
,
Цон
Т.Ю.
. ,
Биофиз. J.
,
1992
, том.
63
(pg.
28
—
34
)
9
Eynard
N.
,
Sixou
S.
,
Dran
N.
,
Тейсси
Дж.
. ,
евро. Дж. Биохим.
,
1992
, том.
209
(pg.
431
—
436
)
10
Sheng
Y.
,
Mancino
V.
,
Birren
B.
. ,
Рез. нуклеиновых кислот.
,
1995
, том.
23
(стр.
1990
—
1996
)
11
Dower
Вт. ,
Рез. нуклеиновых кислот.
,
1988
, том.
16
(стр.
6127
—
6145
)
12
Neumann
E.
,
Schaefer -Ridder
.
,
4.0005
,
Ван
Ю.
,
Хофшнайдер
П.Х.
. ,
EMBO J.
,
1982
, том.
1
(стр.
841
—
845
)
13
KOBORI
M.
,
NOJIMA
9000.
. ,
Рез. нуклеиновых кислот.
,
1993
, том.
21
стр.
2782

14
Mozo
T.
,
Fisher
S.
,
Shizuya
H.
,
Altmann
T.
. ,
Мол. Генерал Жене.
,
1998
, том.
258
(стр.
526
—
570
)

15
,
Чой
С.
,
Джонстон
А.К.
,
Крыло
Р.А.
,
Декан
Р.А.
. ,
Генетика грибов. биол.
,
1997
, том.
21
(стр.
337
—
347
)
© 1999 Oxford University Press
Раздел: 9005
Артикул
Скачать все слайды
Реклама
Цитаты
Альтметрика
Дополнительная информация о метриках
Оповещения по электронной почте
Оповещение об активности статьи
Предварительные уведомления о статьях
Оповещение о новой проблеме
Оповещение о теме
Получайте эксклюзивные предложения и обновления от Oxford Academic
Ссылки на статьи через
Последний
Самые читаемые
Самые цитируемые
Структурное и функциональное понимание активации двойной активности UvrC, ключевого игрока в бактериальном NER
.

Механизмы трансформации диванов

ТОП-7 лучших механизмов диванов на каждый день и для ежедневного сна

Почему так важно выбрать надежный механизм

Книжка

Достоинства:

Недостатки:

Еврокнижка

Плюсы:

Минусы:

Аккордеон

Плюсы:

Минусы:

Телескоп (выкатной)

Плюсы:

Минусы:

Дельфин

Плюсы:

Минусы:

Пума

Преимущества:

Недостатки:

Пантограф (тик-так)

Плюсы:

Недостатки:

Итог

Каталог

Перейти в полный Каталог Диванов

Естественная трансформация, рекомбинация и восстановление

Сохранить цитату в файл

Добавить в коллекции

Добавить в мою библиографию

Ваш сохраненный поиск

Создайте файл для внешнего программного обеспечения для управления цитированием

Полнотекстовые ссылки

принадлежность

Книга

Авторы

Редакторы книг

принадлежность

Книга

Выдержка

Разделы

Похожие статьи

Типы публикаций

Abstract

Благодарности

Каталожные номера

5

4

Цитаты

Альтметрика

Оповещения по электронной почте

Ссылки на статьи через

Последний

Самые читаемые

Самые цитируемые